游戏中的BOSS按照区域划分具有明显的地域特色。宁姆格福作为新手区域拥有约20个BOSS，包括大树守卫、恶兆妖鬼等标志性敌人；利耶尼亚地区以魔法学院为核心，分布着辉石龙、满月女王等26个BOSS；盖利德区域的腐败主题BOSS如碎星拉塔恩共计23个；王城罗德尔则包含初始之王幻影、恶兆本体等关键战斗。啜泣半岛、火山官邸等次级区域也各自拥有10-15个独立BOSS设计。
主线剧情推进必须击败的BOSS共9个，形成明确的难度曲线。从初始的恶兆妖鬼玛尔基特开始，依次为接肢葛瑞克、满月女王蕾娜菈、初始之王戈弗雷幻影、恶兆王蒙葛特本体、火焰巨人、神皮双人组、黑剑玛利喀斯，最终面对艾尔登之兽与拉达冈的连战。这些BOSS战不仅考验玩家操作，还深度参与黄金树律法破碎的核心剧情。
支线BOSS的挑战更具自由度与隐藏性。菈妮支线需击败黑暗弃子艾斯缇；死眠少女菲雅支线最终对决死龙；癫火之王路线要求战胜下水道三指门前的蒙格；而DLC新增的黑夜君临章节则包含碎身巨颚等特殊机制BOSS。这些战斗往往需要特定条件触发，且部分BOSS具备多阶段形态变化，例如女武神玛莲妮娅的二阶段猩红花舞攻击。
从战斗策略来看，BOSS弱点属性与武器选择至关重要。大体型BOSS如飞龙普遍弱雷属性，人形BOSS多数畏惧出血效果，魔法类敌人则容易被突进攻击打断施法。部分BOSS存在环境交互机制，例如利用场地中的石柱躲避熔炉骑士冲锋，或通过升降梯限制死亡鸟的飞行空间。合理搭配骨灰召唤与战技组合能显著降低战斗难度。
